Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Orexin R-2: sc-402343-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Orexin R-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Orexin R-2 Double Nickase (h) et le plasmide Orexin R-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HCRTR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Orexin R-2 | sc-402343-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Orexin R-2 | sc-402343-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HCRTR2 code le récepteur de l’orexine 2 (Orexin R-2), un récepteur couplé aux protéines G des neuropeptides orexine A et orexine B, qui coordonne l’éveil, la stabilité du cycle veille-sommeil, l’appétit et la sortie autonome. Après liaison du ligand, Orexin R-2 active des voies de signalisation via Gq/Gi afin de moduler la dynamique intracellulaire du Ca²⁺, l’activité PLC/PKC et les voies MAPK/ERK en aval, intégrant l’excitabilité neuronale à une régulation neuroendocrinienne plus large. L’activité du récepteur influence la transmission synaptique et des circuits liés au rythme circadien au sein des réseaux hypothalamiques et du tronc cérébral. Des perturbations génétiques et fonctionnelles de HCRTR2 ont été associées à des phénotypes du sommeil et de la vigilance et sont étudiées dans le contexte des mécanismes liés à la narcolepsie, de l’homéostasie métabolique et de la biologie de traits neuropsychiatriques.
Orexin R-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HCRTR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HCRTR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HCRTR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HCRTR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.