Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Oma1 Double Nickase Plasmid (h): sc-402953-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Oma1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Oma1 Double-Nickase-Plasmid (h) und Oma1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf OMA1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Oma1: sc-515788
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Oma1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402953-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Oma1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402953-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Human OMA1 kodiert die stressaktivierte Metalloprotease der inneren Mitochondrienmembran Oma1, einen zentralen Regulator der mitochondrialen Qualitätskontrolle. Oma1 wird bei Membrandepolarisation und proteotoxischem Stress rasch aktiviert, um OPA1 zu spalten, wodurch sich die mitochondriale Dynamik in Richtung Fragmentierung (Fission) verschiebt und Mitophagie, bioenergetisches Remodeling sowie integrierte Stresssignalwege koordiniert werden. Über diese OMA1–OPA1-Achse beeinflusst das Protein die Architektur der Cristae, die Effizienz der Atmungskette und die Anfälligkeit für Apoptose. Eine Fehlregulation der OMA1-abhängigen Proteostase und Dynamik wird mit mitochondrialer Dysfunktion in Verbindung gebracht, wie sie bei Neurodegeneration, kardiometabolischem Stress und weiteren Erkrankungen mit gestörter mitochondrialer Homöostase beobachtet wird.
Oma1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des OMA1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von OMA1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die OMA1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit OMA1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.