Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
OLIG2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2): sc-400670-KO-2
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OLIG2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico OLIG2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: OLIG2 Antibody (1G11): sc-293163
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OLIG2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2) | sc-400670-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
OLIG2 codifica un fattore di trascrizione basic helix-loop-helix che orchestri lo sviluppo neurale regolando la specificazione di linea e la differenziazione dei progenitori degli oligodendrociti e dei precursori dei motoneuroni. In concerto con segnali di sviluppo come Sonic hedgehog e Notch, OLIG2 controlla programmi di espressione genica che influenzano la progressione del ciclo cellulare, lo stato della cromatina e l’impegno verso il destino gliale nel sistema nervoso centrale. Un’espressione deregolata di OLIG2 e reti trascrizionali a valle alterate sono implicate nella biologia dei gliomi maligni, inclusi spostamenti verso stati simil-progenitoriali e programmi cellulari associati alla resistenza. Queste caratteristiche rendono OLIG2 un bersaglio utile per studiare i circuiti trascrizionali dello sviluppo neurobiologico e la plasticità di linea associata ai tumori.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO OLIG2 (h2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene OLIG2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del OLIG2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto OLIG2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina OLIG2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di OLIG2 per lo studio della segnalazione di OLIG2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni OLIG2 critici per la funzione di OLIG2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di OLIG2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal OLIG2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal OLIG2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus OLIG2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal OLIG2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR OLIG2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia OLIG2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio OLIG2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.