OLFM3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406216

概要

OLFM3（olfactomedin 3）は、オルファクトメジン（olfactomedin）ドメインファミリーに属する分泌型糖タンパク質をコードしており、細胞外空間に局在して細胞—細胞間および細胞—マトリックス間の相互作用に関与します。OLFM3は、組織微小環境における免疫・炎症シグナル伝達の調節に関連するとされ、細胞外マトリックスの構築、細胞接着、ならびに骨髄系細胞の挙動制御といった過程と関連づけられています。OLFM3の発現変動は、がんや炎症性疾患など複数の疾患文脈で報告されており、腫瘍—免疫クロストークや間質リモデリングの変化と相関する可能性があります。これらの特性により、OLFM3は微小環境シグナルおよび細胞外制御ネットワークの機序解析に有用な標的となります。

OLFM3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるOLFM3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OLFM3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OLFM3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OLFM3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OLFM3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OLFM3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OLFM3の機能に不可欠なOLFM3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、OLFM3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OLFM3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOLFM3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OLFM3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OLFM3 HDRプラスミド（h）および OLFM3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOLFM3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOLFM3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。