OGFRL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407392

概要

OGFRL1（opioid growth factor receptor-like 1）は、オピオイド増殖因子受容体ファミリーに関連する受容体様タンパク質をコードしており、細胞外からの刺激を細胞内の増殖・生存制御へと結び付ける調節ネットワークに関与すると考えられています。正確な分子機構はまだ十分に解明されていないものの、OGFRL1は増殖、分化、ならびに組織恒常性を制御する経路に関与すると示唆されており、これらの過程はがん化に伴う形質転換や微小環境への適応の際にしばしば再構築されます。複数の疾患文脈にまたがるトランスクリプトーム研究においてOGFRL1の発現パターンの変化が報告されており、細胞状態遷移の候補モジュレーターとしての利用を支持しています。そのためOGFRL1は、増殖制御、ストレス応答、細胞可塑性に影響するシグナル伝達のクロストークを解明する上で関心を集めています。

OGFRL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるOGFRL1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OGFRL1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OGFRL1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OGFRL1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OGFRL1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OGFRL1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OGFRL1の機能に不可欠なOGFRL1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、OGFRL1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OGFRL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOGFRL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OGFRL1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OGFRL1 HDRプラスミド（h）および OGFRL1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOGFRL1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOGFRL1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。