Odf1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405840

概要

ODF1は、外側密線維タンパク質1（Odf1）をコードしており、精巣で高発現する精子尾部の外側密線維の構造要素です。Odf1は、鞭毛運動時の軸糸（アクソネーム）の安定性と弾性反発を支えます。Odf1は精子形成（spermiogenesis）および精子の後期組み立て過程に関与し、細胞骨格の組織化と主部（principal piece）の機械的完全性に寄与します。ODF1依存的な精子尾部構築の破綻は、運動性低下や男性因子不妊の表現型と関連しており、精子無力症（asthenozoospermia）や関連する精子形成異常の機序研究において重要です。発現が限局していることと機能の専門性により、胚細胞における分化依存的な細胞骨格タンパク質制御を解析するための焦点の定まったモデルとなります。

Odf1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるODF1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ODF1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ODF1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Odf1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Odf1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ODF1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Odf1の機能に不可欠なODF1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ODF1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Odf1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOdf1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ODF1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Odf1 HDRプラスミド（h）および Odf1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはODF1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のODF1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。