OCTN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403258

概要

SLC22A4 は、ヒトの有機カチオン／カルニチントランスポーター OCTN1（SLC22 ファミリー）をコードしており、双性イオンや有機カチオン（カルニチン関連基質や抗酸化物質エルゴチオネインを含む）の取り込みおよび排出を担う多回膜貫通型タンパク質です。これら代謝物の細胞内利用可能量を調節することで、OCTN1 は細胞のレドックス恒常性、異物（キセノバイオティクス）処理、代謝ストレス応答に寄与し、上皮系組織、免疫系組織、バリア機能に関与する組織において機能的な影響を及ぼします。SLC22A4 の遺伝的多様性や発現変化は、炎症性疾患および免疫関連疾患における感受性や表現型の修飾と関連づけられており、輸送体を介したシグナル伝達や環境因子との相互作用を研究するうえで重要な結節点となります。

OCTN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC22A4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC22A4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC22A4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OCTN1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OCTN1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC22A4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OCTN1の機能に不可欠なSLC22A4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC22A4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OCTN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOCTN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC22A4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OCTN1 HDRプラスミド（h）および OCTN1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC22A4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC22A4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。