Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NUB1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424677
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NUB1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NUB1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NUB1 Anticuerpo (F-10): sc-377003
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NUB1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424677 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Nub1 (NEDD8 ultimate buster 1) codifica NUB1, una proteína inducible por interferón que se une al modificador similar a la ubiquitina NEDD8 y promueve la eliminación dependiente del proteasoma de sustratos conjugados con NEDD8. Al regular la dinámica de la neddilación y el recambio de proteínas vinculadas a las ligasas E3 cullin-RING, NUB1 influye en la homeostasis del sistema ubiquitina–proteasoma, la progresión del ciclo celular y las respuestas celulares al estrés. NUB1 también interactúa con proteínas similares a la ubiquitina como FAT10, conectando la señalización de la inmunidad innata con la degradación proteica regulada. La desregulación de estas vías se implica con frecuencia en desequilibrios de la proteostasis y fenotipos de señalización inflamatoria, lo que convierte a Nub1 en un nodo útil para estudios mecanísticos en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NUB1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nub1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nub1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nub1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NUB1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nub1 para la investigación de la señalización de NUB1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Nub1 críticos para la función de NUB1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nub1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NUB1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NUB1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nub1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NUB1 (m) y el plásmido HDR NUB1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nub1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nub1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.