NMUR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404637

概要

ニューロメジンU受容体2（NMUR2）は、主に中枢神経系に発現するGタンパク質共役型受容体（GPCR）であり、神経ペプチドであるニューロメジンUによるシグナル伝達を媒介します。NMUR2の活性化は主としてGq/11依存性経路を介して細胞内カルシウム濃度を上昇させ、MAPKをはじめとする他のセカンドメッセンジャー・カスケードを調節することで、神経細胞の興奮性や神経内分泌出力に影響を与えます。これらのシグナルネットワークを通じて、NMUR2はエネルギーバランス、食欲、ストレス応答性、概日リズムに関連した行動の調節に関与します。NMUR2シグナルの変化は、代謝調節異常や神経行動表現型の文脈で検討されており、脳—代謝コミュニケーションの機構研究における標的としての有用性が示されています。

NMUR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNMUR2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NMUR2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NMUR2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NMUR2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NMUR2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NMUR2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NMUR2の機能に不可欠なNMUR2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NMUR2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NMUR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNMUR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NMUR2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NMUR2 HDRプラスミド（h）および NMUR2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNMUR2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNMUR2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。