Plasmide Double Nickase (h) NMDAε3: sc-402942-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NMDAε3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NMDAε3 Double Nickase (h) et le plasmide NMDAε3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GRIN2C. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NMDAε3 | sc-402942-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NMDAε3 | sc-402942-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIN2C code la sous-unité du récepteur NMDA NMDAε3 (GluN2C), un composant de canal ionique activé par le glutamate qui s’assemble avec NR1 et d’autres sous-unités NR2 afin de réguler la transmission synaptique excitatrice. NMDAε3 contribue aux propriétés biophysiques du récepteur qui modèlent l’influx de calcium, la plasticité synaptique et l’expression génique dépendante de l’activité, ce qui la relie à des voies centrales du neurodéveloppement et de la signalisation synaptique. Via son couplage à des cascades en aval dépendantes du Ca2+, telles que CaMK et des programmes transcriptionnels liés à CREB, GRIN2C influence la maturation des réseaux neuronaux et le fonctionnement des circuits. Des modifications de la composition en sous-unités des récepteurs NMDA ainsi qu’une dysrégulation de GRIN2C ont été étudiées dans le contexte de phénotypes neuropsychiatriques et neurodéveloppementaux, soulignant sa pertinence pour des études mécanistiques de la neurotransmission excitatrice.
NMDAε3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GRIN2C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GRIN2C. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GRIN2C. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GRIN2C.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.