NLP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406794
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NLP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NLP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NLP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406794 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NINL codifica a proteína ninein-like (NLP), um fator associado ao centrossomo e aos microtúbulos que sustenta a organização centrossomal, a ancoragem de microtúbulos e a dinâmica do citoesqueleto necessária para o tráfego intracelular e a divisão celular. A NLP está ligada à maturação do centrossomo e a processos de nucleação/organização de microtúbulos que moldam a formação do fuso mitótico e mantêm a estabilidade do genoma durante a mitose. A perturbação da regulação do centrossomo e do fuso é relevante para distúrbios proliferativos e fenótipos de instabilidade cromossômica, tornando o NINL um alvo útil para dissecar vias que conectam a função do centrossomo à progressão do ciclo celular. Em células humanas, estudos sobre NINL também esclarecem mecanismos de transporte dependente de microtúbulos e a organização espacial de organelas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NLP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NINL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NINL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NINL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NLP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NINL para a investigação da sinalização de NLP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NINL críticos para a função NLP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NINL para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NLP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NLP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NINL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NLP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NLP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NINL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NINL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.