NIK CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424749

개요

Map3k14는 마우스 세포에서 비정형(noncanonical) NF-κB 경로의 핵심 조절자로 작동하는 MAP3K인 NF-κB 유도 키나아제(NIK)를 암호화합니다. NIK는 TNF 수용체 초가족의 일부 구성원으로부터 들어오는 신호를 통합해 IKKα를 통해 NF-κB2 p100이 p52로 가공되도록 촉진하며, 그 결과 림프기관 형성, B세포 성숙, 수지상세포 기능, 염증성 사이토카인 네트워크를 조절하는 전사 프로그램을 형성합니다. 면역 항상성을 유지하려면 NIK의 안정성이 엄격하게 조절되어야 하며, NIK 신호의 조절 이상은 만성 염증, 면역 조절 장애, 그리고 림프계 및 기질(stromal) 구획에서의 종양성 과정과 연관되어 왔습니다. NF-κB2/RelB 상류의 신호 허브로서 NIK는 자가면역 유사 표현형, 감염에 의해 유도되는 면역 리모델링, 종양 연관 염증성 미세환경 등 다양한 맥락에서 자주 연구됩니다.

NIK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Map3k14 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Map3k14 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Map3k14의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NIK 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NIK 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Map3k14 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NIK 기능에 중요한 Map3k14 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Map3k14 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NIK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 NIK CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Map3k14 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NIK HDR 플라스미드 (m) 및 NIK HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Map3k14 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Map3k14 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.