Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401641

概要

CHRNB2は、神経型ニコチン性アセチルコリン受容体（nAChR）のβ2サブユニットをコードしています。nAChRはリガンド作動性の陽イオンチャネルで、αサブユニットとともにヘテロマーの五量体として組み立てられ、膜興奮性の調節に関与します。アセチルコリンまたはニコチンが結合すると、β2含有nAChRはNa⁺およびCa²⁺の流入を媒介し、コリン作動性シグナルをカルシウム依存性経路へと結び付け、神経伝達物質放出、シナプス可塑性、回路発達に影響を与えます。CHRNB2の機能は、ドーパミン作動性をはじめとする各種ニューロモジュレーター系ネットワークの調節を通じて、報酬、注意、覚醒を司る過程とも交差します。CHRNB2の遺伝学的・機能的変化は、神経精神疾患様の表現型や発作感受性との関連が報告されており、神経モデルにおける機序研究にとって重要な標的であることが示唆されています。

Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCHRNB2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CHRNB2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CHRNB2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CHRNB2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2の機能に不可欠なCHRNB2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CHRNB2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CHRNB2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 HDRプラスミド（h）および Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCHRNB2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCHRNB2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。