Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418955

概要

Chrna6は、神経型ニコチン性アセチルコリン受容体（nAChR）のα6サブユニットをコードします。nAChRはリガンド作動性カチオンチャネルであり、アセチルコリンやニコチンに応答して膜興奮性と神経伝達物質放出を調節します。α6を含むnAChRはドーパミン作動性回路やその他のカテコールアミン作動性回路に多く存在し、カルシウム流入を制御するとともに、シナプス伝達や可塑性を形成します。コリン作動性神経伝達経路を介して、CHRNA6は報酬に関連するネットワーク活動や、刺激に駆動される神経調節に寄与します。CHRNA6の遺伝学的・機能的多様性は、ニコチン応答の変化や神経行動表現型と関連づけられており、依存症の生物学やドーパミン作動性回路の機能障害モデルにおける重要性を支持しています。

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるChrna6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Chrna6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Chrna6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Chrna6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6の機能に不可欠なChrna6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Chrna6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Chrna6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 HDRプラスミド（m）および Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはChrna6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のChrna6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。