Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) NF45: sc-402042-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)NF45 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NF45 (h) y el plásmido de doble nickasa NF45 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ILF2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NF45 Anticuerpo (H-4): sc-365283
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) NF45 | sc-402042-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) NF45 | sc-402042-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El ILF2 humano codifica NF45, un factor de unión a ARN y ADN que forma un heterodímero funcional con ILF3/NF90 para regular la transcripción, el procesamiento de ARN, la estabilidad del ARNm y la traducción. NF45 participa en respuestas celulares al estrés y en programas de expresión génica asociados a la inmunidad, con funciones descritas en el control de la progresión del ciclo celular y el mantenimiento de la integridad del genoma a través de su influencia en el metabolismo de los ácidos nucleicos. Por estas actividades, ILF2/NF45 se estudia con frecuencia en vías vinculadas a la proliferación y la apoptosis, y su desregulación se ha asociado con la biología tumoral y con respuestas alteradas al estrés genotóxico. NF45 también se investiga en el contexto de la señalización antiviral e inflamatoria, donde es importante el control posranscripcional de transcritos relacionados con citocinas.
NF45 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ILF2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ILF2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ILF2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ILF2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.