Plasmide Double Nickase (r) neurexin I: sc-437279-NIC
- Espèces cibles: rat
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (r) neurexin I correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide neurexin I Double Nickase (r) et le plasmide neurexin I Double Nickase (r2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant . Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: neurexin Iα Antibody (17): sc-136001
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (r) neurexin I | sc-437279-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (r2) neurexin I | sc-437279-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La neurexine I (NRXN1) est une molécule d’adhésion cellulaire présynaptique qui organise la formation et la maturation des synapses en se liant à des partenaires postsynaptiques tels que les neuroligines et les LRRTM. Grâce à l’épissage alternatif, la neurexine I diversifie les programmes de reconnaissance synaptique et influence la probabilité de libération des neurotransmetteurs, l’arrimage des vésicules et l’exocytose dépendante du calcium, en s’intégrant à des voies qui contrôlent l’assemblage synaptique et la plasticité. Dans des modèles du système nerveux de rat, la fonction de NRXN1 est couramment étudiée dans le contexte de l’équilibre excitation/inhibition, de la connectivité des circuits et du remodelage dépendant de l’activité. Des altérations de la signalisation des neurexines ont été associées dans la littérature à des mécanismes de maladies neurodéveloppementales et neuropsychiatriques, ce qui étaye son utilisation pour analyser la vulnérabilité synaptique et les phénotypes de réseau in vivo et in vitro.
neurexin I Le plasmide double nickase (r) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus dans les lignées cellulaires rat. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de . Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de . En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de .
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.