Neurensin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423681

概要

Nrsn1はNeurensin-1（ニューレンシン1）をコードしており、ニューレンシン1はニューロンで豊富に発現する膜関連タンパク質で、エンドソーム輸送や、神経突起内における小胞コンパートメントの編成に関与すると考えられています。ニューレンシン1は、神経回路の結合性に重要な細胞内膜動態やカーゴの仕分け制御などを通じて、シナプスの発達と維持を支える過程に関連づけられてきました。マウスおよびヒトの遺伝学的研究では、Nrsn1の発現変化やネットワーク上の文脈の変化が、神経発達および神経精神疾患様の表現型と関連することが報告されており、行動を制御する回路との関連性が示唆されています。ニューレンシン1は、神経細胞における膜輸送のマーカーおよび調節因子として、エンドソーム機能とシナプス構造、ならびに神経細胞の恒常性を結びつける経路の解明に有用です。

Neurensin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNrsn1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Nrsn1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Nrsn1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Neurensin-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Neurensin-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Nrsn1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Neurensin-1の機能に不可欠なNrsn1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Nrsn1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Neurensin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNeurensin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Nrsn1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Neurensin-1 HDRプラスミド（m）および Neurensin-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNrsn1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNrsn1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。