Plasmide Double Nickase (m) NCoA-5: sc-432820-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NCoA-5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NCoA-5 Double Nickase (m) et le plasmide NCoA-5 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ncoa5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NCoA-5 | sc-432820-NIC | 20 µg | $410.00 |
Ncoa5 code le coactivateur 5 des récepteurs nucléaires (NCoA‑5), un corégulateur transcriptionnel qui module l’expression génique en interagissant avec des récepteurs nucléaires activés par un ligand et avec d’autres facteurs de transcription. Dans les cellules murines, NCoA‑5 contribue à une régulation, dépendante de la chromatine, de programmes transcriptionnels métaboliques et inflammatoires, reliant la signalisation des récepteurs nucléaires aux décisions de changement d’état cellulaire. Une activité altérée de NCoA‑5 a été associée, dans des modèles expérimentaux, à une dérégulation de l’homéostasie de l’insuline et des lipides ainsi qu’à une expression accrue de gènes pro‑inflammatoires, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude de phénotypes de type syndrome métabolique. Ces propriétés font de Ncoa5 une cible utile pour disséquer des réseaux transcriptionnels intégrant signalisation hormonale, régulation épigénétique et crosstalk immuno‑métabolique.
NCoA-5 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ncoa5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ncoa5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ncoa5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ncoa5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.