NAT-8L Double Nickase Plasmid (h): sc-415533-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das NAT-8L Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- NAT-8L Double-Nickase-Plasmid (h) und NAT-8L Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf NAT8L abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
NAT-8L Double Nickase Plasmid (h) | sc-415533-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NAT-8L Double Nickase Plasmid (h2) | sc-415533-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane NAT8L-Gen kodiert NAT-8L, eine N‑Acetyltransferase, die die Bildung von N‑Acetylaspartat (NAA) aus Aspartat und Acetyl‑CoA katalysiert und damit die mitochondriale Nutzung von Acetyl‑CoA mit der metabolischen Kopplung zwischen Neuronen und Gliazellen verbindet. NAA ist ein wichtiger Hirnmetabolit und ein Vorläufer für die Bereitstellung von Acetat während der Myelinlipidsynthese, wodurch NAT‑8L in Signal- und Stoffwechselwege eingebunden ist, die Bioenergetik, Lipidstoffwechsel und die Unterstützung von Oligodendrozyten steuern. Eine veränderte NAA‑Homöostase ist ein typischer Befund in der Neurobildgebung und wird häufig mit beeinträchtigter neuronaler Integrität sowie demyelinisierenden oder neurodegenerativen Prozessen in Verbindung gebracht. Unterschiede in Expression oder Aktivität von NAT8L wurden in Studien zur Gehirnentwicklung, zu Axon‑Glia‑Interaktionen und zu metabolischen Stressantworten untersucht, die für Mechanismen neurologischer Erkrankungen relevant sind.
NAT-8L Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des NAT8L-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von NAT8L abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die NAT8L-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit NAT8L-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.