Na⁺ CP type IIIα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406612

概要

SCN3Aは、ヒトの電位依存性ナトリウムチャネルNa⁺ CP type IIIαをコードしています。これは孔形成性のαサブユニットであり、興奮性細胞における活動電位の開始および伝播に必要な、速く一過性のNa⁺流入を担います。チャネルのゲーティング特性や膜局在は、脱分極閾値の調節、発火頻度、活動依存的シグナル伝達などを含む神経興奮性ネットワークと統合されて機能します。SCN3Aの機能は、より広範なイオン恒常性やシナプス伝達経路とも関わっており、ナトリウム電流の変化は回路発達や興奮性を乱す可能性があります。SCN3Aの遺伝学的・機能的な制御異常は、神経発達および発作に関連する表現型と関連づけられており、チャネル病や電気生理学的機能障害の機序研究において重要です。

Na+ CP type IIIα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSCN3A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SCN3A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SCN3Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Na+ CP type IIIαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Na+ CP type IIIαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SCN3A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Na+ CP type IIIαの機能に不可欠なSCN3Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SCN3Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Na+ CP type IIIα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNa+ CP type IIIα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SCN3A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Na+ CP type IIIα HDRプラスミド（h）および Na+ CP type IIIα HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSCN3Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSCN3A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。