Na+ CP type Iα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422818
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Na+ CP type Iα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Na+ CP type Iα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Na+ CP type Iα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422818 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Scn1a codifica a subunidade α do canal de sódio dependente de voltagem Na+ CP tipo Iα, um determinante principal da iniciação e propagação do potencial de ação em neurônios. Ao regular as correntes rápidas de entrada de Na+ no segmento inicial do axônio e nos nós de Ranvier, molda os limiares de disparo neuronal, o tempo dos potenciais de ação e a sincronia da rede. A função de Scn1a se cruza com o equilíbrio excitatório–inibitório, a sinalização dependente de atividade e vias de homeostase iônica que influenciam a transmissão sináptica e a estabilidade dos circuitos. Alterações genéticas e funcionais de SCN1A estão fortemente associadas à suscetibilidade a crises convulsivas e a fenótipos do neurodesenvolvimento, tornando-o um locus-chave para estudos mecanísticos em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Na+ CP type Iα (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Scn1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Scn1a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Scn1a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Na+ CP type Iα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Scn1a para a investigação da sinalização de Na+ CP type Iα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Scn1a críticos para a função Na+ CP type Iα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Scn1a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Na+ CP type Iα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Na+ CP type Iα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Scn1a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Na+ CP type Iα Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Na+ CP type Iα (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Scn1a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Scn1a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.