NAP1L3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407403

概要

NAP1L3（nucleosome assembly protein 1-like 3）は、NAP1ファミリーに属するヒストンシャペロンであり、ヌクレオソームの組み立ておよび解体に関与して、DNA複製、転写、DNA修復の過程におけるクロマチンダイナミクスを支えています。ヒストンH2A–H2Bの沈着や交換を調節することで、NAP1L3はエピジェネティック制御、ゲノム安定性、分化プログラムに連動した細胞状態の移行に影響し得ます。クロマチンリモデリングやヒストンシャペロン活性の異常は、がんや発生異常でみられる転写ネットワークの破綻としばしば関連しており、そのためNAP1L3は機構解析研究に有用な結節点となります。NAP1L3の機能を調べることは、クロマチン組み立て経路が複製ストレス応答や転写制御とどのように連携するかを明らかにする助けになります。

NAP1L3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNAP1L3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NAP1L3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NAP1L3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NAP1L3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NAP1L3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NAP1L3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NAP1L3の機能に不可欠なNAP1L3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NAP1L3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NAP1L3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNAP1L3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NAP1L3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NAP1L3 HDRプラスミド（h）および NAP1L3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNAP1L3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNAP1L3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。