N4BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429812
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- N4BP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico N4BP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
N4BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-429812 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
N4bp1 (N4BP1; proteína 1 ligante de NEDD4) codifica um regulador citosólico da sinalização imune inata que se associa a vias dependentes de ubiquitina e modula programas transcricionais inflamatórios. Em células imunes de camundongo, a N4BP1 tem sido relacionada ao controle da atividade da via NF-κB a jusante da sinalização por receptores de reconhecimento de padrões, influenciando a indução de citocinas e estados de ativação dependentes do estímulo. Por meio de suas interações com componentes da maquinaria de ubiquitinação, a N4BP1 está posicionada para afetar a estabilidade de complexos de sinalização, o turnover de proteínas e as respostas transcricionais a jusante. Assim, a função desregulada de N4BP1 é relevante para pesquisas sobre homeostase imune, inflamação desencadeada por infecções e modelos de patologia mediada pelo sistema imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO N4BP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene N4bp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do N4bp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do N4bp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína N4BP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de N4bp1 para a investigação da sinalização de N4BP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) N4bp1 críticos para a função N4BP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos N4bp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo N4BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo N4BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus N4bp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo N4BP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR N4BP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia N4bp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo N4bp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.