Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
N-CoR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422771
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- N-CoR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico N-CoR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:N-CoR Anticorpo (F-1): sc-515934
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
N-CoR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422771 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Ncor1 de camundongo codifica o correpressor 1 de receptor nuclear (N‑CoR), uma proteína de arcabouço que monta complexos de repressão transcricional com HDAC3, TBL1/TBLR1 e outros fatores para regular a acessibilidade da cromatina e a expressão gênica. O N‑CoR modula a sinalização de receptores nucleares e redes transcricionais mais amplas que governam diferenciação, homeostase metabólica e programação de células imunes, incluindo a regulação de conjuntos de genes inflamatórios. Por meio da desacetilação coordenada e do recrutamento de correpressores, o Ncor1 influencia o comprometimento de linhagem e as respostas celulares a sinais hormonais e de citocinas. A desregulação da repressão dependente de N‑CoR tem sido associada a estados transcricionais aberrantes relevantes para a biologia do câncer, fenótipos do neurodesenvolvimento e disfunção imunológica em modelos experimentais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO N-CoR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ncor1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ncor1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ncor1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína N-CoR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ncor1 para a investigação da sinalização de N-CoR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ncor1 críticos para a função N-CoR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ncor1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo N-CoR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo N-CoR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ncor1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo N-CoR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR N-CoR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ncor1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ncor1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.