N-CoR CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422771

概要

マウスのNcor1は、核内受容体コリプレッサー1（N‑CoR）をコードしており、HDAC3、TBL1/TBLR1、その他の因子とともに転写抑制複合体を組み立てて、クロマチンのアクセス性と遺伝子発現を制御する足場タンパク質である。N‑CoRは核内受容体シグナル伝達や、分化、代謝恒常性、免疫細胞のプログラミングを司るより広範な転写ネットワークを調節し、炎症関連遺伝子群の制御にも関与する。協調的な脱アセチル化とコリプレッサーのリクルートを通じて、Ncor1は系譜決定およびホルモンやサイトカイン刺激に対する細胞応答に影響を与える。実験モデルでは、N‑CoR依存的な抑制の破綻が、がん生物学に関連する異常な転写状態、神経発達表現型、免疫機能障害と結び付くことが示されている。

N-CoR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNcor1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ncor1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ncor1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、N-CoRタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、N-CoRシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ncor1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• N-CoRの機能に不可欠なNcor1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ncor1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• N-CoR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびN-CoR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ncor1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  N-CoR HDRプラスミド（m）および N-CoR HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNcor1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNcor1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。