Myosin IIIb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414483

Visão geral

MYO3B codifica a miosina IIIb, uma proteína motora dependente de actina que acopla a hidrólise de ATP ao movimento ao longo de F-actina e participa na remodelação do citoesqueleto. Membros da família das miosinas III estão implicados na regulação da dinâmica de protrusões de membrana e da organização de feixes de actina, processos centrais para a polaridade celular, o tráfego vesicular e alterações dependentes de sinalização na arquitetura celular. Por meio dessas funções, o MYO3B sustenta comportamentos celulares impulsionados por actina, como migração e adesão, que se articulam com vias que controlam a tensão do citoesqueleto e a mecanotransdução. A desregulação das redes actina–miosina é amplamente relevante para distúrbios que envolvem a integridade epitelial e a estrutura de células neurossensoriais, tornando o MYO3B um alvo útil para estudos mecanísticos do controlo do citoesqueleto.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myosin IIIb (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYO3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYO3B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYO3B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myosin IIIb.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYO3B para a investigação da sinalização de Myosin IIIb, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYO3B críticos para a função Myosin IIIb
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYO3B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Myosin IIIb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Myosin IIIb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYO3B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Myosin IIIb Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Myosin IIIb (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYO3B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYO3B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.