MYL9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401577

概要

MYL9はミオシン軽鎖9をコードしており、ミオシンIIモーター活性を制御することでアクチン‐ミオシン収縮性を調節する制御性軽鎖です。MYL9のリン酸化状態は、Ca²⁺/カルモジュリン依存性ミオシン軽鎖キナーゼおよびRhoA–ROCK経路によるシグナル伝達を統合し、ストレスファイバー形成、フォーカルアドヒージョンの動態、細胞形状の変化を制御します。MYL9は平滑筋収縮に寄与するほか、細胞質分裂、細胞移動、内皮細胞や線維芽細胞の収縮応答などの非筋細胞プロセスにも関与します。MYL9に関連する収縮性や細胞骨格リモデリングの破綻は、血管緊張の変化、組織線維化、がん生物学に関連する浸潤性の細胞挙動の変化と関連付けられています。

MYL9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMYL9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MYL9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MYL9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MYL9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MYL9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MYL9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MYL9の機能に不可欠なMYL9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MYL9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MYL9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMYL9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MYL9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MYL9 HDRプラスミド（h）および MYL9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMYL9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMYL9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。