Mx1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400977

概要

MX1はミクソウイルス抵抗性タンパク質1（Mx1）をコードしており、Mx1はダイナミン様のインターフェロン刺激性GTPアーゼとして、多様なRNAウイルスの複製を制限することで内在性の抗ウイルス防御を担います。Mx1はJAK–STAT経路を介したI型およびIII型インターフェロンシグナル伝達の下流で誘導され、ISGF3によって駆動される転写を中核とする、より広範な自然免疫プログラムに組み込まれます。ウイルスヌクレオカプシドの輸送や複製複合体の完全性を調節することで、Mx1はサイトカイン産生を形作り、免疫細胞に固有の抵抗性にも関与する細胞ストレス応答に寄与します。MX1発現の異常はインターフェロン経路活性化の分子指標として広く用いられており、ウイルス感受性、慢性炎症状態、ならびにインターフェロンシグネチャーの上昇を特徴とする腫瘍微小環境に関する研究に関連します。

Mx1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMX1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MX1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MX1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Mx1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Mx1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MX1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Mx1の機能に不可欠なMX1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MX1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Mx1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMx1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MX1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Mx1 HDRプラスミド（h）および Mx1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMX1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMX1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。