Mucin 17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404622

概要

MUC17はムチン17をコードしており、ムチン17は膜に係留された高度にO-グリコシル化されたムチンで、消化管上皮細胞の管腔側（頂端側）表面に豊富に存在し、粘膜バリアと上皮の恒常性維持を支えています。ムチン17は細胞表面の水和、病原体の排除、機械的・化学的ストレスからの保護に寄与し、またグリコカリックスにおける相互作用を介して細胞接着やシグナル伝達を調節し得ます。MUC17の発現量やグリコシル化パターンの変化は、腸管の炎症性疾患や上皮性悪性腫瘍で報告されており、このムチンがバリアの完全性、分化、ストレス応答を制御する経路と関連することが示唆されています。上皮防御のインターフェースを構成する要素として、MUC17は粘膜炎症、宿主—微生物相互作用、ならびに腫瘍に伴う糖タンパク質構造の変化を扱うモデルで頻繁に研究されています。

Mucin 17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMUC17遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MUC17内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MUC17のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Mucin 17タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Mucin 17シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MUC17欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Mucin 17の機能に不可欠なMUC17エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MUC17ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Mucin 17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMucin 17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MUC17遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Mucin 17 HDRプラスミド（h）および Mucin 17 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMUC17ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMUC17標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。