MTMR7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405863

概要

MTMR7はミオチューブラリン関連タンパク質7をコードしており、触媒活性をもつ脂質ホスファターゼとしてホスファチジルイノシトール3-リン酸およびホスファチジルイノシトール（3,5）二リン酸を脱リン酸化し、ホスホイノシチド依存的な膜輸送を調節します。エンドソーム動態、受容体リサイクリング、ベシクル成熟の制御を通じて、MTMR7はEGFR/MAPK経路やPI3K関連ネットワークなどのシグナル伝達経路からの出力の制御に寄与します。MTMR7活性の変化は細胞増殖および遊走の異常表現型と関連づけられており、がん化シグナルや上皮の恒常性に関する研究における重要性が示唆されています。さらに、ホスホイノシチドの代謝回転における役割は、疾患関連の細胞状態でしばしば破綻するオートファジーやリソソーム機能など、より広範なプロセスとも交差しています。

MTMR7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMTMR7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MTMR7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MTMR7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MTMR7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MTMR7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MTMR7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MTMR7の機能に不可欠なMTMR7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MTMR7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MTMR7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMTMR7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MTMR7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MTMR7 HDRプラスミド（h）および MTMR7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMTMR7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMTMR7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。