MTF-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411609

Descripción general

MTF2 (factor de transcripción 2 de unión a elementos de respuesta a metales) codifica MTF-2, un regulador de la cromatina asociado al grupo Polycomb que participa en programas de represión transcripcional que controlan la especificación de linaje y la estabilidad del estado celular. MTF-2 se vincula a la función de PRC2 y al silenciamiento dependiente de la metilación de H3K27 en loci del desarrollo, influyendo en la accesibilidad de la cromatina y en redes reguladoras de genes de largo alcance. A través de estos mecanismos epigenéticos, MTF2 contribuye al control de la proliferación, la diferenciación y las salidas transcripcionales en respuesta al estrés. Se ha informado de actividad desregulada de MTF2 en estudios de biología del cáncer y de trastornos del desarrollo, donde un direccionamiento alterado de Polycomb puede perturbar los paisajes de expresión génica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MTF-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MTF2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MTF2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MTF2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MTF-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MTF2 para la investigación de la señalización de MTF-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MTF2 críticos para la función de MTF-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MTF2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MTF-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MTF-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MTF2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MTF-2 (h) y el plásmido HDR MTF-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MTF2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MTF2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.