MTA1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400942

概要

MTA1（metastasis associated 1）は、クロマチン結合性の共調節因子をコードしており、NuRD（ヌクレオソーム再構成・脱アセチル化）複合体の主要構成要素の一つです。ATP依存的なヌクレオソーム再構成とヒストン脱アセチル化を統合することで、転写プログラムの形成に関与します。MTA1はHDAC1/2やCHD4、配列特異的転写因子との相互作用を通じて、上皮間葉転換（EMT）、DNA損傷応答、ホルモン受容体シグナル伝達、細胞周期制御に影響を及ぼします。MTA1の発現や活性の変化は、複数のがん種における腫瘍進展や浸潤性表現型と関連づけられており、腫瘍促進性経路や分化経路を調節し得ます。クロマチン状態を制御する核内因子として、MTA1は転写抑制／活性化の動態、エピジェネティックな可塑性、転移関連遺伝子発現の機構の研究で頻繁に扱われています。

MTA1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMTA1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MTA1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MTA1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MTA1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MTA1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MTA1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MTA1の機能に不可欠なMTA1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MTA1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MTA1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMTA1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MTA1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MTA1 HDRプラスミド（h）および MTA1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMTA1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMTA1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。