MSY2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405504

概要

YBX2 は MSY2 をコードしており、Y-box モチーフを認識して結合する、保存性の高い Y-box 型 RNA/DNA 結合タンパク質である。MSY2 は mRNA の安定化、貯蔵、翻訳制御を介して転写後の遺伝子発現を調節する。MSY2 は生殖細胞の生物学および精子形成における役割で最もよく知られており、減数分裂期および減数分裂後の分化過程において、mRNP の組み立てやタンパク質合成のタイミング制御に寄与する。体細胞においても、Y-box ファミリータンパク質は RNA プロセシング、ストレス応答プログラム、ならびに増殖や生存に影響する細胞状態の転換に関与する。YBX2 の発現異常は男性不妊との関連が示されており、腫瘍生物学に関連する転写シグネチャーでも報告されていることから、RNA 中心の制御経路を解明するための機序的標的としての活用が支持されている。

MSY2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるYBX2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、YBX2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、YBX2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MSY2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MSY2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、YBX2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MSY2の機能に不可欠なYBX2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、YBX2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MSY2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMSY2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、YBX2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MSY2 HDRプラスミド（h）および MSY2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはYBX2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のYBX2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。