Plasmide Double Nickase (h) MRP1: sc-400456-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MRP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MRP1 Double Nickase (h) et le plasmide MRP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABCC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MRP1 Antibody (QCRL-1): sc-18835
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MRP1 | sc-400456-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MRP1 | sc-400456-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCC1 code pour la protéine humaine associée à la résistance multidrogue 1 (MRP1), un transporteur de la famille des ATP-binding cassette (ABC) qui assure, de manière dépendante de l’ATP, l’efflux d’anions organiques, de xénobiotiques et de métabolites conjugués au glutathion, au glucuronide ou au sulfate. MRP1 contribue à la détoxification cellulaire et à l’homéostasie rédox en régulant l’équilibre intracellulaire du glutathion ainsi que le transport du leucotriène C4 et d’autres médiateurs de l’inflammation. Par son rôle dans le transport membranaire et les voies de réponse au stress, l’activité d’ABCC1 influence le devenir intracellulaire des médicaments, la gestion du stress oxydant et les fonctions de barrière dans divers tissus. Une expression ou une fonction dérégulée d’ABCC1/MRP1 est fréquemment étudiée dans le contexte de phénotypes de résistance multidrogue, de la signalisation inflammatoire et d’altérations du transport des métabolites observées dans de nombreux modèles de maladies.
MRP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABCC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABCC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABCC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABCC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.