mPRα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402143
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mPRα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico mPRα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mPRα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402143 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PAQR7 codifica o receptor de progesterona de membrana alfa (mPRα), um receptor de progestagênios com sete domínios transmembrana da família PAQR, que medeia a sinalização rápida e não genômica da progesterona na membrana plasmática e em membranas intracelulares. O mPRα influencia processos celulares como sinalização por nucleotídeos cíclicos, cascatas de quinases, fluxo de cálcio e a regulação da apoptose e da motilidade celular, com efeitos dependentes do contexto sobre programas transcricionais por meio de vias downstream de segundos mensageiros. A expressão de PAQR7 foi relatada em tecidos reprodutivos e não reprodutivos, sustentando papéis na responsividade a hormônios esteroides, na regulação neuroendócrina e na sinalização imune e epitelial. A sinalização desregulada de mPRα tem sido investigada na biologia hormônio-responsiva e em contextos relevantes para doenças, como distúrbios reprodutivos e modelos de câncer associado a hormônios, nos quais alterações na responsividade à progesterona podem afetar proliferação, invasão e vias de adaptação ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO mPRα (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PAQR7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PAQR7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PAQR7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína mPRα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PAQR7 para a investigação da sinalização de mPRα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PAQR7 críticos para a função mPRα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PAQR7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo mPRα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo mPRα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PAQR7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo mPRα Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR mPRα (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PAQR7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PAQR7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.