Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MOF Double Nickase Plasmid (h): sc-401891-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MOF Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MOF Double-Nickase-Plasmid (h) und MOF Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf KAT8 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: MOF: sc-81163
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MOF Double Nickase Plasmid (h) | sc-401891-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MOF Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401891-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KAT8 kodiert die Histon-Acetyltransferase MOF (MYST1), einen zentralen „Writer“ der H4K16-Acetylierung (H4K16ac), der die Chromatinzugänglichkeit und die Transkriptionsleistung moduliert. MOF wirkt innerhalb multiproteinärer Komplexe, um Genexpressionsprogramme zu koordinieren, die mit DNA-Replikation, DNA-Schadenssignalgebung und der Aufrechterhaltung der Genomstabilität verknüpft sind, einschließlich Crosstalk mit ATM/DDR-Signalwegen. Durch die Kontrolle der Nukleosomenarchitektur und die acetylierungsabhängige Rekrutierung von Chromatinregulatoren beeinflusst MOF den Zellzyklus, die Differenzierung und Stressantworten. Eine Dysregulation von KAT8/MOF und veränderte H4K16-Acetylierungsmuster wurden mit aberranten epigenetischen Zuständen in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistischen Knotenpunkt in der Chromatin- und Genomintegritätsforschung stützt.
MOF Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des KAT8-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von KAT8 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die KAT8-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit KAT8-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.