Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) MMP9: sc-421679-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MMP9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MMP9 Double Nickase (m) et le plasmide MMP9 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mmp9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MMP9 Antibody (E-11): sc-393859
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MMP9 | sc-421679-NIC | 20 µg | $410.00 |
La métalloprotéinase matricielle 9 (MMP9), codée chez la souris par le gène *Mmp9*, est une endopeptidase sécrétée dépendante du zinc qui dégrade des composants de la matrice extracellulaire et transforme des molécules bioactives afin de réguler le remodelage tissulaire. L’activité de MMP9 s’inscrit à l’interface de voies contrôlant la migration des leucocytes, les gradients de cytokines et de chimiokines, l’angiogenèse et la réparation des plaies, et elle est fréquemment étudiée dans le contexte de la signalisation inflammatoire et du renouvellement de la matrice extracellulaire. Dans le microenvironnement tumoral et lors d’inflammations chroniques, une expression altérée de *Mmp9* peut influencer l’intégrité de la membrane basale, l’infiltration des cellules immunitaires et la perméabilité vasculaire. Une dérégulation de MMP9 a été associée à des modèles murins de progression tumorale, d’arthrite, de neuroinflammation et de remodelage fibrotique, ce qui en fait une cible courante pour des études mécanistiques des phénotypes induits par la matrice.
MMP9 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mmp9 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mmp9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mmp9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mmp9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.