Plásmido Doble Nickase (h) MMP2: sc-400126-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MMP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MMP2 (h) y el plásmido de doble nickasa MMP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MMP2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MMP2 Anticuerpo (2C1): sc-13594
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MMP2 | sc-400126-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MMP2 | sc-400126-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **MMP2** codifica la metaloproteinasa de matriz 2 (gelatinasa A), una endopeptidasa dependiente de zinc que degrada el colágeno de tipo IV y otros sustratos de la matriz extracelular, regulando así la remodelación de la membrana basal y las interacciones célula–matriz. La actividad de MMP2 se controla mediante su secreción como zimógeno, su activación en la superficie celular y su inhibición por los TIMP, lo que la vincula con la proteólisis pericelular y con cambios dinámicos en la arquitectura tisular. A través del recambio de la MEC, MMP2 influye en la angiogénesis, la reparación de heridas, la inflamación y las vías de migración celular que dependen de la señalización por integrinas y de cascadas de proteasas. La expresión o actividad desregulada de MMP2 se asocia con la remodelación patológica de la matriz observada en la invasión y metástasis del cáncer, la remodelación cardiovascular y las afecciones fibróticas e inflamatorias, lo que la convierte en una diana clave para estudios mecanísticos sobre la regulación del microambiente tisular.
MMP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MMP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MMP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MMP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MMP2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.