mitochondrial ferritin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401694
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mitochondrial ferritin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico mitochondrial ferritin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:mitochondrial ferritin Anticorpo (6G3): sc-517048
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mitochondrial ferritin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401694 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FTMT codifica a ferritina mitocondrial, uma proteína de armazenamento de ferro localizada na matriz mitocondrial que sequestra o excesso de ferro e limita a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) induzida pelo ferro. Ao tamponar os pools de ferro lábil, o FTMT influencia a homeostase redox mitocondrial, a integridade da fosforilação oxidativa e a resposta celular ao estresse metabólico e oxidativo. Sua atividade se cruza com o metabolismo do ferro e com a biologia do heme e dos clusters Fe–S, conectando a função mitocondrial a vias mais amplas de manejo do ferro. A expressão desregulada de FTMT tem sido associada a alterações no acúmulo de ferro e a fenótipos de dano oxidativo relevantes para a neurodegeneração, respostas ao estresse relacionadas à anemia e modelos de disfunção mitocondrial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO mitochondrial ferritin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FTMT em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FTMT, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FTMT na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína mitochondrial ferritin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FTMT para a investigação da sinalização de mitochondrial ferritin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FTMT críticos para a função mitochondrial ferritin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FTMT para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo mitochondrial ferritin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo mitochondrial ferritin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FTMT. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo mitochondrial ferritin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR mitochondrial ferritin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FTMT para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FTMT definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.