Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) MISR II: sc-402523-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MISR II consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MISR II (h) y el plásmido de doble nickasa MISR II (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a AMHR2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MISR II Anticuerpo (D-9): sc-377413
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MISR II | sc-402523-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MISR II | sc-402523-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMHR2 (MISR II) codifica el receptor de tipo II de la hormona antimülleriana, una quinasa transmembrana de serina/treonina que inicia la señalización en respuesta a la AMH. Tras la unión del ligando, MISR II recluta receptores de tipo I y activa la fosforilación de SMAD1/5/8, desencadenando programas transcripcionales posteriores que regulan la regresión de los conductos de Müller y, de forma más amplia, la diferenciación de tejidos reproductivos. En células humanas, la actividad de AMHR2 se entrecruza con vías del desarrollo y endocrinas que moldean la función gonadal y la biología del tracto reproductor. La expresión o señalización desregulada de AMHR2 se ha asociado con trastornos del desarrollo sexual y se ha estudiado en el contexto de tumores de células de la granulosa ovárica y otras patologías del sistema reproductor.
MISR II El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AMHR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AMHR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AMHR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AMHR2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.