MISR II CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402523

概要

AMHR2はヒト抗ミュラー管ホルモン受容体2型（MISR II）をコードしており、AMHに結合してSMAD1/5/8を介したシグナル伝達を開始する膜貫通型セリン／スレオニンキナーゼです。これにより、ミュラー管の発生プログラムや性腺分化の調節が行われます。受容体の活性化は、細胞運命決定、組織リモデリング、生殖路の成熟に関与する転写応答を協調的に制御し、TGF-β/BMP経路のより広範なダイナミクスとも統合されます。AMH–AMHR2シグナル伝達の異常は、性分化疾患や生殖内分泌に関する表現型と関連づけられており、MISR II発現の変化は、卵巣由来を含むミュラー系譜腫瘍などの文脈で研究されています。経路上の結節点として、AMHR2はリガンド依存的な受容体シグナル伝達、SMAD介在性の遺伝子制御、ならびに状況依存的な増殖・分化応答を解析するうえで有用です。

MISR II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるAMHR2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、AMHR2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、AMHR2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MISR IIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MISR IIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、AMHR2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MISR IIの機能に不可欠なAMHR2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、AMHR2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MISR II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMISR II CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、AMHR2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MISR II HDRプラスミド（h）および MISR II HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAMHR2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAMHR2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。