MIP-3β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403239
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIP-3β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MIP-3β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MIP-3β Anticorpo (ZZ22): sc-74233
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIP-3β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403239 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CCL19 codifica a quimiocina MIP-3β (também conhecida como CCL19), um ligante de CCR7 que direciona a quimiotaxia de células T naïve, células T de memória central e células dendríticas maduras em direção a tecidos linfoides. Ao moldar o tráfego de leucócitos, ela favorece o homing para os linfonodos, a formação da sinapse imune e a apresentação coordenada de antígenos dentro da zona de células T. A sinalização MIP-3β–CCR7 cruza-se com vias acionadas por GPCR que regulam remodelamento do citoesqueleto, adesão e polarização migratória, influenciando a arquitetura e a função de órgãos linfoides secundários. A expressão ou sinalização desregulada de CCL19 tem sido associada a padrões alterados de infiltração imune em inflamação crônica, autoimunidade e microambientes tumorais, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos em imunologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MIP-3β (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCL19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCL19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCL19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MIP-3β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCL19 para a investigação da sinalização de MIP-3β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCL19 críticos para a função MIP-3β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCL19 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MIP-3β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MIP-3β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCL19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MIP-3β Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MIP-3β (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCL19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCL19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.