MGRN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421607

概要

Mgrn1 は、E3ユビキチン‐タンパク質リガーゼである MGRN1 をコードしており、ニューロンを含むさまざまな細胞種におけるユビキチン依存的なタンパク質分解回転（ターンオーバー）およびエンドソーム—リソソーム輸送の調節因子です。MGRN1 は膜タンパク質のソーティングと受容体恒常性を制御し、ユビキチン化を小胞輸送およびプロテオスタシス経路に結び付けます。マウスでは、Mgrn1 機能の変化が神経変性様の表現型や色素異常と関連することが報告されており、神経細胞の維持機構やメラノソーム生物学の研究における重要性が示されています。MGRN1 依存的なユビキチンシグナル伝達を解析することは、タンパク質品質管理や輸送の欠陥がどのように細胞ストレス応答に寄与するかを理解する上で有用です。

MGRN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMgrn1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Mgrn1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mgrn1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MGRN1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MGRN1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Mgrn1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MGRN1の機能に不可欠なMgrn1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mgrn1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MGRN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMGRN1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Mgrn1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MGRN1 HDRプラスミド（m）および MGRN1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMgrn1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMgrn1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。