MGRN1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421607
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MGRN1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MGRN1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MGRN1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421607 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Mgrn1 codifica a ligase E3 de ubiquitina-proteína MGRN1, um regulador da degradação de proteínas dependente de ubiquitina e do tráfego endossomal–lisossomal em neurônios e em outros tipos celulares. A MGRN1 modula a triagem de proteínas de membrana e a homeostase de receptores, conectando a ubiquitinação às vias de transporte vesicular e de proteostase. Em camundongos, alterações na função de Mgrn1 têm sido associadas a fenótipos de neurodegeneração e a anormalidades de pigmentação, reforçando sua relevância para estudos de manutenção neuronal e da biologia dos melanossomos. Dissecar a sinalização de ubiquitina dependente de MGRN1 é útil para entender como defeitos no controle de qualidade proteico e no tráfego contribuem para respostas celulares ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MGRN1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mgrn1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mgrn1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mgrn1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MGRN1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mgrn1 para a investigação da sinalização de MGRN1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mgrn1 críticos para a função MGRN1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mgrn1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MGRN1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MGRN1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mgrn1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MGRN1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MGRN1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mgrn1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mgrn1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.