Plasmide Double Nickase (h) mGluR-1a: sc-401436-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) mGluR-1a correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide mGluR-1a Double Nickase (h) et le plasmide mGluR-1a Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GRM1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) mGluR-1a | sc-401436-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) mGluR-1a | sc-401436-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRM1 code le récepteur métabotropique du glutamate mGluR‑1a, un RCPG de classe C qui se couple principalement à Gq/11 afin de stimuler la phospholipase Cβ, la signalisation via l’inositol‑trisphosphate/diacylglycérol, la mobilisation du Ca²⁺ intracellulaire et l’activation de la protéine kinase C. mGluR‑1a engage également des voies liées à MAPK/ERK et à la PI3K, et module la transmission et la plasticité synaptiques en régulant les canaux ioniques et la libération des neurotransmetteurs. Dans les tissus humains, la signalisation dépendante de GRM1 est étudiée dans le contexte de la régulation des circuits neuronaux et de la neurotransmission excitatrice, des perturbations génétiques et fonctionnelles étant associées à des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs. Une activité dérégulée de mGluR‑1a est aussi analysée pour ses effets sur des réseaux de signalisation cellulaire pertinents pour la prolifération, la différenciation et les réponses au stress.
mGluR-1a Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GRM1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GRM1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GRM1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GRM1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.