Plasmide Double Nickase (h) METTL6: sc-416547-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) METTL6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide METTL6 Double Nickase (h) et le plasmide METTL6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant METTL6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: METTL6 Antibody (F-8): sc-515214
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) METTL6 | sc-416547-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) METTL6 | sc-416547-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
METTL6 code une méthyltransférase dépendante de la S-adénosyl-L-méthionine impliquée dans la modification de l’ARN, dont l’activité a été rapportée sur certains ARNt cytosoliques spécifiques, pouvant influencer la fidélité de la traduction et la production du protéome. En façonnant les profils de méthylation des ARNt, METTL6 est liée à des processus cellulaires tels que le contrôle de la traduction, la protéostasie et l’adaptation au stress, lesquels peuvent secondairement affecter les programmes de prolifération et de différenciation. La dérégulation d’enzymes de modification de l’ARN, notamment des méthyltransférases d’ARNt, a été associée à des phénotypes de croissance altérés et à un couplage transcriptome–protéome modifié dans des contextes de maladies humaines, faisant de METTL6 une cible pertinente pour des études mécanistiques. Dans des modèles cellulaires humains, la perturbation de METTL6 permet d’examiner comment les marques épitranscriptomiques des ARNt s’articulent avec la régulation de l’expression génique et les transitions d’état cellulaire.
METTL6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus METTL6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de METTL6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de METTL6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de METTL6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.