Plasmide Double Nickase (h) METTL14: sc-406936-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) METTL14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide METTL14 Double Nickase (h) et le plasmide METTL14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant METTL14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) METTL14 | sc-406936-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) METTL14 | sc-406936-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
METTL14 code un composant central du complexe « writer » de méthyltransférase de l’ARN N6‑méthyladénosine (m6A). Il s’associe à METTL3 et à des protéines adaptatrices telles que WTAP pour déposer des marques m6A sur l’ARNm et d’autres ARN. Ces modifications épitranscriptomiques régulent l’épissage, l’export nucléaire, la stabilité et la traduction des ARN, façonnant ainsi des programmes d’expression génique qui contrôlent les choix de destinée cellulaire, la prolifération et les réponses au stress. La signalisation m6A dépendante de METTL14 recoupe des voies impliquées dans les réponses aux dommages de l’ADN, la « stemness » et la régulation de l’immunité innée, via des changements du renouvellement des transcrits et de la production traductionnelle. Une activité ou une expression dérégulée de METTL14 a été associée à un contrôle anormal, de type épigénétique, de réseaux oncogéniques et développementaux, ce qui en fait une cible fréquente des études mécanistiques en biologie tumorale et en différenciation.
METTL14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus METTL14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de METTL14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de METTL14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de METTL14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.