METRNL Double Nickase Plasmid (m): sc-431669-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das METRNL Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- METRNL Double-Nickase-Plasmid (m) und METRNL Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Metrnl abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
METRNL Double Nickase Plasmid (m) | sc-431669-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
METRNL Double Nickase Plasmid (m2) | sc-431669-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Metrnl kodiert Meteorin-like (METRNL), ein sekretiertes, glykosyliertes Protein, das an der interzellulären Signalübertragung beteiligt ist und metabolische sowie inflammatorische Programme koordiniert. In Mausgeweben wurde die METRNL-Expression mit dem Crosstalk zwischen Fettgewebe und Immunsystem, der Modulation der Makrophagen-Polarisierung und der Regulation der Energiehomöostase als Reaktion auf physiologische Stressoren wie Kälteeinwirkung und körperliche Aktivität in Verbindung gebracht. Beschriebene funktionelle Zusammenhänge umfassen Signalwege, die die Zytokin-Signalgebung und den Umbau der extrazellulären Matrix beeinflussen, wodurch METRNL einen nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung des systemischen Stoffwechsels und der Gewebeanpassung darstellt. Fehlregulierte METRNL-assoziierte Signalgebung wurde in Kontexten wie Adipositas, Insulinresistenz und inflammatorischen Phänotypen untersucht und unterstützt mechanistische Forschung zu krankheitsrelevanten Stoffwechselwegen.
METRNL Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Metrnl-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Metrnl abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Metrnl-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Metrnl-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.