Met Lentiviral Activation Particles (h): sc-400101-LAC

Das humane **MET**-Gen kodiert die Rezeptor-Tyrosinkinase Met, den hochaffinen Rezeptor für den Hepatozyten-Wachstumsfaktor (HGF). Nach Ligandenbindung unterzieht sich Met einer Autophosphorylierung und aktiviert nachgeschaltete Signalwege über PI3K–AKT, RAS–MAPK, STAT sowie SRC/FAK, um Proliferation, Überleben, Motilität, epithelial-mesenchymale Transitionen und die Gewebemorphogenese zu regulieren. Eine Fehlregulation von **MET** durch Amplifikation, Überexpression, Mutation oder aberrante HGF-Stimulation wird mit invasiven Wachstumsprogrammen und veränderten Interaktionen zwischen Zellen und ihrer Mikroumgebung in Verbindung gebracht, die für Onkologie und Entwicklungsbiologie relevant sind. In vitro wird die MET-Signalgebung häufig im Hinblick auf ihre Rollen bei Migration, angiogener Signalgebung und resistenzassoziiertem Rewiring von Netzwerken untersucht.

Met Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente MET-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Met Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der MET-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Met-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen MET-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.