Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Med6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403204
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Med6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Med6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Med6 Anticorpo (D-2): sc-390474
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Med6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403204 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MED6 codifica a Med6, uma subunidade essencial do complexo Mediator que faz a ponte entre fatores de transcrição específicos de sequência e a RNA polimerase II, coordenando o início da transcrição e a responsividade dos promotores. Ao sustentar a montagem e a estabilidade da maquinaria de pré-iniciação, Med6 contribui para a regulação de programas de expressão gênica associados ao estado celular, incluindo vias que controlam proliferação, diferenciação e transcrição adaptativa ao estresse. Alterações na função do Mediator podem remodelar os resultados transcricionais globais e são frequentemente estudadas no contexto de sinalização oncogênica, desregulação do desenvolvimento e instabilidade genômica ligada à transcrição. Assim, a perturbação de MED6 oferece um ponto de entrada acessível para dissecar como a transcrição dependente do Mediator integra sinais em cromatina e na atividade da RNA polimerase II em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Med6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MED6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MED6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MED6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Med6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MED6 para a investigação da sinalização de Med6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MED6 críticos para a função Med6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MED6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Med6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Med6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MED6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Med6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Med6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MED6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MED6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.