MCM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400959

概要

MCM2（ミニクロモソーム維持複合体構成因子2）は、複製起点のライセンシングを担い、S期におけるDNAの巻き戻し（アンワインディング）を駆動するMCM2–7ヘリカーゼ複合体内の必須AAA+ ATPaseです。MCM2は、複製起点の発火、複製フォークの進行、ならびにチェックポイント応答を協調させることでゲノム安定性の維持に寄与し、G1/S境界を越える秩序だった細胞周期進行を支えます。MCM2の発現や複製ライセンシングが破綻すると、複製ストレス、DNA損傷シグナル、染色体不安定性につながり得ます。これらは、がん生物学や増殖性疾患の研究で頻繁に検討される過程です。リプリソームの中核因子として、MCM2はATR/CHK1依存的な複製ストレス経路や、遺伝毒性（ゲノトキシック）な撹乱に対する応答の文脈でも研究されています。

MCM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMCM2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MCM2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MCM2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MCM2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MCM2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MCM2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MCM2の機能に不可欠なMCM2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MCM2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MCM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMCM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MCM2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MCM2 HDRプラスミド（h）および MCM2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMCM2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMCM2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。