MBOAT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426448

概要

Mboat2は、膜結合型O-アシルトランスフェラーゼドメイン含有タンパク質2（MBOAT2）をコードしており、リゾリン脂質の再アシル化を介したリン脂質リモデリングに関与する、ER（小胞体）および膜関連のアシルトランスフェラーゼです。膜グリセロリン脂質への脂肪酸アシル基の取り込みに影響を与えることで、MBOAT2は膜組成、オルガネラの恒常性、ならびに細胞ストレス応答に関連する脂質依存的シグナル伝達過程に影響し得ます。リン脂質代謝の異常は、代謝機能障害、炎症、がんに伴う膜リモデリングなどと広く関連しているため、Mboat2は脂質駆動性表現型の機序研究における有用な入口となります。マウス系では、Mboat2の遺伝学的攪乱により、アシルトランスフェラーゼネットワークや代償的な脂質リモデリングを経路レベルで解析することが可能になります。

MBOAT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMboat2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Mboat2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mboat2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MBOAT2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MBOAT2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Mboat2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MBOAT2の機能に不可欠なMboat2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mboat2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MBOAT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMBOAT2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Mboat2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MBOAT2 HDRプラスミド（m）および MBOAT2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMboat2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMboat2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。